核酸凝膠染色

SPEED Biosystems擁有一系列核酸凝膠染色劑，包括GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra和RedView™，用于凝膠染色前后染色，以及SafeGreen™和SafeRed™加注染料，用于電泳前與核酸混合。這些染色是下一代熒光核酸凝膠染色劑，旨在替代高度誘變的溴化乙二醇（EB）。這些染料優(yōu)于艾爾巴基，具有高靈敏度、低毒性和*佳穩(wěn)定性。由于成本低且靈敏度普遍足夠，電子核酸被廣泛用于核酸凝膠染色。然而，雌雄胺具有高度誘變性。除污和廢棄物處理相關(guān)的安全風(fēng)險(xiǎn)和成本最終可能使染料成本高昂且使用不便。

用于凝膠染色前后染色的凝膠染色（GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™）

優(yōu)點(diǎn)

★ 比 EB 安全。Ames測(cè)試及其他檢測(cè)顯示其非突變劑且無(wú)細(xì)胞毒性。

★ 室溫穩(wěn)定。

★ 兼容標(biāo)準(zhǔn)藍(lán)光LED和紫外線透光燈。

★ 配合藍(lán)光使用可減少凝膠切除及后續(xù)克隆的誘變。

圖1。GreenView™、GreenView™ Plus和GreenView™ Ultra的凝膠染色結(jié)果（左），以及與SYBR Safe™和GelGreen™（右）的對(duì)比結(jié)果。左圖：在每個(gè)凝膠上分別以25 ng、50 ng和100 ng（從左到右）的3條通道，分別裝入1 kb的DNA梯子（NEB，編號(hào)#N0468S）的兩倍序列稀釋液，然后用GreenView™、GreenView™ Plus和GreenView™ Ultra進(jìn)行后染色。右圖：結(jié)果顯示GreenView™的靈敏度與SYBR Safe™相近，而GelGreen™、GreenView™ Plus和GreenView™ Ultra的靈敏度要好得多。

圖2。用RedView™和GelRed™染色效果。每條凝膠上分別以25 ng、50 ng和100 ng（從左到右）的3條通道，將1 kb的DNA梯子進(jìn)行兩倍序列稀釋，然后分別用RedView™和GelRed™進(jìn)行后染色。結(jié)果顯示RedView™與GelRed™的靈敏度相似。

除了比 GreenView™、GreenView™ Plus 和 RedView™ 相比 SYBR Safe DNA 凝膠染色更安全外，細(xì)胞通透性更低，因此更安全（見(jiàn)圖3）。

圖3。使用SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus和RedView進(jìn)行細(xì)胞通透性測(cè)試。Hela細(xì)胞是在37歲時(shí)孵育的？配備1臺(tái)SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus和RedView，持續(xù)30分鐘。

GreenView Plus和RedView無(wú)法穿透細(xì)胞膜以結(jié)合活細(xì)胞的DNA，且比SYBR Safe安全得多，后者能迅速進(jìn)入細(xì)胞并染色細(xì)胞核。

如何選擇適合你的DNA染色？

凝膠加載染料（SafeGreen™ 和 SafeRed™）

優(yōu)點(diǎn)

★ 配方為6倍加載緩沖區(qū)，隨時(shí)可用。

★ 安全無(wú)毒，是EB的替代品。

圖4。用SafeGreen™（左）和SafeRed™（右）預(yù)混DNA梯進(jìn)行凝膠染色。

SafeGreen™和SafeRed™專門設(shè)計(jì)為對(duì)細(xì)胞膜不透水，從而通過(guò)防止染料進(jìn)入活細(xì)胞來(lái)降低基因毒性（見(jiàn)圖5）

圖5。使用SYBR Safe™、SafeGreen™和SafeRed™進(jìn)行細(xì)胞滲透性測(cè)試。Hela細(xì)胞在37oC下與1枚SYBR Safe™、SafeGreen™和SafeRed™一起孵育30分鐘。SafeGreen™和SafeRed™無(wú)法穿透細(xì)胞膜以結(jié)合活細(xì)胞的DNA，且比SYBR Safe™安全得多，后者能迅速進(jìn)入細(xì)胞并染色細(xì)胞核。